HI实验操作注意事项
          时间:2021-03-01   来源:林希   作者:华南生物

                  HI实验在临床工作中应用广泛,结果判定快速,操作方法简单实用。但可能受一些因素影响,使得试验结果不准确,从而无法指导生产,因此对在实际操作中有可能出现的误差进行分析。

                  1. 4单位抗原的配制

          病毒的血凝价需准确,现用现配,在抗体测定前做回归试验。

                  2.抗原

          新抗原分装后保存,分批使用,可以减少反复冻融效价降低,加4单位抗原时必须边加边混匀。

                  3.稀释液

                  根据《高致病性禽流感诊断技术》GB/TI8936-2003进行PBS配制,pH为7.0时, 红细胞沉降效果最佳。

                  4.被检血清

                  理想的被检血清是淡黄色液体,无污染、无杂质、无腐败变性、无溶血、无胶冻样的物质。

                  5. 1%红细胞悬液

                  离心时间过长,转速过快导致红细胞破裂,引起溶血。红细胞离心后粘稠度高,可采用反向移液法配制以确保足够的红细胞量,避免出现跳孔。浓度过高,沉降点过大,血凝抑制价上升,浓度过低,沉降点过小,血凝抑制价下降。同一批次的血清样品不宜更换不同批次的红细胞,边加边混匀。从最后一孔开始加红细胞,滴头避免接触孔内液体,影响结果。

                  6. 其它因素

                  6.1 器材

                  96 孔V型板比U型板的实验结果判定更准确。吸头一次性使用,及时更换可避免污染。使用微量移液器速度不宜过快,加样时悬滴。稀释样品不宜产生气泡,吸头不宜紧贴孔底,注意慢吸快打,吸头内不留液体。振荡器振荡时间不宜太长或强度太大,避免红细胞破裂。

                  6.2实验室环境温度

          温度过高,时间过长,结果出现快,使整板无凝集现象,使得结果误判。

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